試劑 | REAGENT

細胞外囊泡 (EVs) 是由所有細胞類型釋放並存在於所有生物體液中的膜狀天然納米顆粒。通常，EVs 根據其生物發生途徑大致分為三大亞型——微泡 (MVs)、外泌體和凋亡小體，大小、含量以及生物學功能[1]、[2]。除了這種分類外，也逐漸出現囊泡的各種亞群，尤其是各種類型的外泌體[3]。作為自然界非常EVs 含有生物活性分子作為來自其生產細胞的貨物。自身的納米粒子，EVs 固有地受益於免疫耐受性、循環系統的穩定性以及穿過生物屏障到達大腦等遠處器官的能力 [2], [4] . [1], [5]. 這些大分子的水平轉移使 EVs 成為細胞間通訊的重要介質，可以在治療上加以利用 [1], [2], [5]. 使用 EVs 作為 nanoca rriers 進一步提供了對它們進行特異性生物工程以攜帶治療性貨物分子的可能性。將貨物裝載到 EV 中的技術可以大致分為兩種基本方法：外源性和內源性裝載。外源性裝載通常涉及將貨物摻入或裝載到預-通過各種方法分離 EV，包括共孵育、超聲處理和電穿孔 [2]、[6]、[7]。對於內源性加載，親本細胞經過基因工程改造以過表達所需的 RNA 或蛋白質，有或沒有特定的然後在 EV 生物發生過程中將其整合到分泌的囊泡中 [2]、[6]、[8]、[9]。

 

為了準確確定工程化 EV 的治療潛力，精心設計的體內應用是必不可少的。為了正確測量 EV 攜帶的貨物的治療效果、動力學和動力學，準確可靠的給藥策略至關重要。然而，迄今為止，治療性 EV 研究領域受到包括 EV 生產所有領域的不一致的影響，包括 EV 分離、量化和表徵的方法 [10]。EV 製造中標準化、簡化和明確定義的過程是可靠的治療性 EV 的關鍵在臨床前和臨床環境中給藥。

 

本綜述旨在簡要列出目前使用的 EV 給藥方法，討論其潛在的量化技術並確定與這些方法相關的可能陷阱。有利的劑量策略基於 EV 量化方法，該方法首先針對 EV 工程策略、親本細胞類型和分離方法量身定制，其次針對體內實驗應用和潛在科學問題量身定制。2017 年，一個國際聯盟發表了對來自 EV 研究各個領域的 1000 多項研究的薈萃分析，揭示了 EV 隔離方法的廣泛異質性 [10]。他們報告了 190 種獨特的隔離方法和 1,038 種從生物流體中提取 EV 的獨特方案，但文件不足主要實驗參數的確定。這項研究有力地表明，儘管有大量可用的 EV 分離、量化和表徵方法，但普遍適用和標準化的協議仍然難以捉摸。因此，當設計用於體內應用的 EV 給藥策略時，請仔細考慮. 並且需要注意實驗參數和 EV 特性。

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